对于荧光染色切片往往需要用到冰冻包埋及切片基本原理:•快速冷却:将新鲜的组织样本迅速冷却到低温(通常为-20°C至-30°C),使其变得坚硬。•切片:使用冷冻切片机将冷冻的组织切成薄片。由于组织没有经过固定的步骤,因此可以较好地保存细胞膜表面和细胞内的多种酶活性以及抗原免疫活性。优势:•快速:制作过程比石蜡切片更快捷,通常只需几分钟到几十分钟。•简便:不需要复杂的脱水、透明化和浸蜡步骤。•活性保留:能够较好地保存细胞内的酶活性和抗原免疫活性,适用于需要检测这些活性的研究。Prussian蓝染色用于检测铁沉积。南京阿里辛蓝染色
TTC染色的操作相对简单,不需要复杂的仪器设备。•直观性强:染色结果直观,易于观察和分析。•快速:染色过程较快,可以在短时间内完成。注意事项•温度控制:染色过程中需要严格控制温度,过高或过低的温度都会影响染色效果。•时间控制:孵育时间不宜过长,否则可能会导致非特异性染色。•固定处理:染色后应及时进行固定处理,以防止组织自溶。总结TTC染色是一种简单且有效的组织学染色方法,广泛应用于心肌梗死和脑卒中模型的研究中,能够直观地显示组织中的活性区域和缺血损伤区域,为疾病机制的研究和药物疗效的评估提供了重要手段。南京Von Kossa染色结果分析病理切片染色用于显微镜下观察组织结构。
普鲁士蓝的应用领域1. 铁代谢相关疾病:•在肝脏、脾脏、骨髓等***中,鲁士蓝染色用于检测铁沉积,帮助诊断和评估铁过载疾病,如血色素沉着症(Hemochromatosis)和继发性铁过载。2. 脑组织中的铁沉积:•在神经退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病)的研究中,鲁士蓝染色用于检测脑组织中的铁沉积,这些沉积可能与疾病的进展有关。3. **研究:•在某些类型的**中,铁代谢异常可能导致铁沉积,鲁士蓝染色可以用于检测这些异常。染色步骤1. 样品准备:•将组织切片固定在载玻片上,通常使用福尔马林或其他固定剂。•用蒸馏水或PBS缓冲液清洗切片。2. 还原反应:•将切片浸入含有盐酸(HCl)和亚硫酸钠(Na₂S₂O₃)的溶液中,在室温下孵育一定时间(通常是10-20分钟),以还原三价铁离子。
组织切片是病理学诊断上面必要的过程,但你以为检体只有做成石蜡包埋切片,然后染H&E染色后诊断一个方法吗?其实在组织病理上还有很多不同的包埋及切片方法,配上各种原理不同的染色法,就可以进行各式各样的组织分析。***,我们整理了常用的组织病理学切片技术及染色方法,供大家对切片技术上有更多的认识~因应各种不同的诊断及实验需求,选择适合的染色,才能取得比较好的结果。????H&E:观察组织「形态」的标准染色方法,是组织学中**重要、**常被使用的化学染色方法。????特殊化学染色:种类繁多,针对各种不同的组织细胞生化特性,有多种不同的染色可以应用。银染色用于观察神经纤维和细胞外基质。
3. 普鲁士蓝反应:•用蒸馏水清洗切片后,将其浸入含有亚铁**钾(K₄[Fe(CN)₆])的溶液中,在室温下孵育一段时间(通常是10-20分钟),形成普鲁士蓝沉淀。4. 复染:•为了更好地观察组织结构,通常会进行复染,例如使用苏木精染色(Hematoxylin)。5. 脱水、透明和封片:•用乙醇梯度脱水,然后用二甲苯透明处理,***用中性树胶封片。6. 显微镜观察:•在显微镜下观察染色后的切片,蓝色沉淀表示铁的存在。优点•特异性高:鲁士蓝染色对铁离子具有高度特异性,能够准确地检测和定位铁沉积。•操作简便:染色步骤相对简单,不需要复杂的仪器设备。•结果直观:染色后的铁沉积呈现明显的蓝色,易于观察和分析。染色技术需要严格的实验室操作规范。南京HE染色检测
染色切片帮助展示动物模型的病理变化。南京阿里辛蓝染色
TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)染色是一种常用的组织学染色方法,主要用于检测组织中的活性心肌细胞和脑组织的缺血性损伤。TTC染色在实验研究中特别有用,尤其是在评估心肌梗死和脑卒中模型中的缺血区域。TTC染色的基本原理TTC是一种无色的水溶性化合物,在活细胞中通过线粒体内的脱氢酶的作用被还原成红色的不溶性产物——甲臜(formazan)。这种红色产物只在有代谢活性的细胞中形成,而在坏死或缺血的细胞中则不会被还原,因此这些区域保持无色或白色。应用领域1. 心肌梗死模型:•在心肌梗死的研究中,TTC染色用于区分正常的心肌组织和梗死区域。正常的心肌组织会被染成红色,而梗死区域则呈现白色。•通过测量梗死区域与总心肌面积的比例,可以定量分析心肌梗死的程度。南京阿里辛蓝染色
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