避免产生沉淀物1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,青岛动物血清厂家,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤,青岛动物血清厂家。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。相同动物细胞代谢进程中有许多物质是动物细胞所必需而本身无法组成的的,青岛动物血清厂家,例如碱基、氨基酸等微量物质。青岛动物血清厂家
瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.青岛动物血清生产商长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。
常规细胞培养需要添加血清来维持细胞的增殖能力,尽管血清可以满足一般细胞培养需求,但在进行营养成分优化和标记特定成分进行研究的实验中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是将血清循环通过中空纤维,并在血清中补充生理盐水以维持渗透压,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于关注小分子浓度的特殊研究,包括:研究蛋白质组学、同位素标记、细胞信号传导和报告基因分析、报告基因细胞系的筛选等。
佐剂由于不同个体对同一抗原的反应性不同,而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱,因此常常在注射抗原的同时,加入能增强抗原的抗原性物质,以刺激机体产生较强的免疫反应,这种物质称为免疫佐剂。佐剂除了延长抗原在体内的存留时间,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激网状内皮系统,使参与免疫反应的免疫活性细胞增多,促进T细胞与B细胞的相互作用,从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。常用的佐剂是福氏佐剂(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份羊毛脂与石腊油的比例,视需要可调整为1:2~9(V/V),这是不完全福氏佐剂,在每毫升不完全佐剂加入1~20mg卡介苗就成为完全佐剂。在猪场生产中,对于血清学检测结果进行正确地分析,有助于获取有效的猪群信息。
血清保存方法1.如何保存血清?血清应该在-20℃保存。如果一次无法用完一瓶,应该无菌分装后冷冻保存。注意避免反复冻融。2.为什么储存在冰箱中的血清会出现沉淀?有些胎牛血清产品没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。冻融方法正确解冻方法:将血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小时,使之缓慢部分溶解,然后再放在室温下使之全溶。注意:溶解过程中要每隔一段时间缓慢地摇动血清使之混匀。切记:避免37℃水浴。血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸,蛋白质,维生素(特别是脂溶性维生素如A,D,E,K)。青岛胎牛血清订购
血清的保质期是5年,储存温度-10 ~ -30℃。青岛动物血清厂家
血清是否需要做灭活处理?这取决于您的应用。灭活过程中,会导致血清中某些成分被破坏,如氨基酸,维生素,生长因子等。所以只有在您的实验对血清有特殊要求时,才会考虑对血清进行灭活处理。如您的实验对血清中的某种组分敏感,需要去除该组分。比较常见的情况是需要去除血清中的补体蛋白,因为补体在机体中参与细胞杀伤,巨噬细胞和淋巴细胞活化,肥大细胞和血小板组胺释放,平滑肌收缩等过程,所以一般在免疫学相关研究中及肌细胞和干细胞的培养过程中需要对血清进行灭活处理。青岛动物血清厂家
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