[VIP第1年] 指数:3
病理染色切片对于诊断各种疾病，如**，具有重要意义。1.冰冻包埋及切片：•基本原理：冰冻切片（frozensection）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。这种方法能够较好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶的活性以及抗原的免疫活性。•应用：由于冰冻切片的制作过程比石蜡切片快捷、简便，因此多应用于手术中的快速病理诊断。它可以在短时间内提供病理信息，帮助实验人员在实验过程中做出及时的明确的决策。 常见的染色方法包括苏木精-伊红染色（H&E）。南京抗酸染色
组织切片是病理学诊断上面必要的过程，但你以为检体只有做成石蜡包埋切片，然后染H&E染色后诊断一个方法吗?其实在组织病理上还有很多不同的包埋及切片方法，配上各种原理不同的染色法，就可以进行各式各样的组织分析。***，我们整理了常用的组织病理学切片技术及染色方法，供大家对切片技术上有更多的认识~因应各种不同的诊断及实验需求，选择适合的染色，才能取得比较好的结果。????H&E：观察组织「形态」的标准染色方法，是组织学中**重要、**常被使用的化学染色方法。????特殊化学染色：种类繁多，针对各种不同的组织细胞生化特性，有多种不同的染色可以应用。南京维多利亚蓝染色Periodic Acid-Schiff (PAS)染色用于检测糖类物质。
普鲁士蓝的应用领域1. 铁代谢相关疾病：•在肝脏、脾脏、骨髓等***中，鲁士蓝染色用于检测铁沉积，帮助诊断和评估铁过载疾病，如血色素沉着症（Hemochromatosis）和继发性铁过载。2. 脑组织中的铁沉积：•在神经退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病）的研究中，鲁士蓝染色用于检测脑组织中的铁沉积，这些沉积可能与疾病的进展有关。3. **研究：•在某些类型的**中，铁代谢异常可能导致铁沉积，鲁士蓝染色可以用于检测这些异常。染色步骤1. 样品准备：•将组织切片固定在载玻片上，通常使用福尔马林或其他固定剂。•用蒸馏水或PBS缓冲液清洗切片。2. 还原反应：•将切片浸入含有盐酸（HCl）和亚硫酸钠（Na₂S₂O₃）的溶液中，在室温下孵育一定时间（通常是10-20分钟），以还原三价铁离子。
TUNEL染色的染色步骤1. 样品准备：•将组织切片或细胞固定在载玻片上，通常使用4%多聚甲醛或其他固定剂。•进行蛋白酶K处理，以增加细胞膜的通透性，使TdT能够进入细胞并接触DNA。2. TUNEL反应：•准备TUNEL反应混合液，包括TdT酶和标记的dUTP（如荧光素或生物素标记的dUTP）。•将反应混合液滴加到样品上，在适当的温度下孵育一定时间（通常为1小时左右）。3. 洗涤：•用PBS缓冲液或其他适当的洗涤液清洗样品，去除未结合的dUTP。4. 信号检测：•如果使用的是荧光素标记的dUTP，可以直接在荧光显微镜下观察。•如果使用的是生物素标记的dUTP，则需要进一步与链霉亲和素-荧光素复合物或其他显色试剂结合，然后在显微镜下观察。通过染色切片，可以清晰区分细胞核和细胞质。
2. 病变特征的识别：•通过特定的染色方法，可以识别出不同类型的病变特征。例如，Masson三色染色可以区分胶原纤维（蓝色）、肌纤维（红色）和细胞核（蓝黑色），这对于评估心肌梗死、肺纤维化、肝纤维化等疾病模型中的纤维化程度非常有用。3. 炎症反应的评估：•某些染色方法可以用来检测炎症反应。例如，PAS（过碘酸雪夫染色）可以显示糖原和其他多糖物质，有助于评估炎症过程中糖原的沉积情况。4. 细胞增殖和凋亡的分析：•免疫组化染色如Ki-67染色可以用来标记增殖细胞，TUNEL染色可以用来检测细胞凋亡。这些染色方法对于评估**模型或其他涉及细胞增殖和死亡的模型非常重要。镀银染色用于显示神经纤维和基底膜。南京高尔基体染色公司
Trichrome染色用于区分胶原、肌肉和细胞核。南京抗酸染色
在脑卒中模型中用到的染色方法：•在脑卒中（如中风）的研究中，TTC染色同样用于区分正常的脑组织和缺血性损伤区域。正常的脑组织会被染成红色，而缺血区域则保持无色。•通过这种方法，研究人员可以直观地观察到脑组织中的缺血**和半影区，并进行定量分析。染色步骤1. 准备样品：•将动物安乐死后，迅速取出心脏或脑组织，并切成一定厚度的切片（通常为2mm厚）。2. 染色：•将切片放入预先配制好的TTC溶液中（通常是1%~2%的TTC溶解在生理盐水中）。•将切片置于37°C恒温水浴中孵育一段时间（通常为15-30分钟）。3. 固定：•染色完成后，将切片转移到4%多聚甲醛或其他固定液中进行固定，以防止组织自溶和保存染色结果。4. 拍照和分析：•固定后的切片可以用相机拍照记录，然后使用图像分析软件测量梗死区域和总组织面积，计算梗死面积占总组织面积的百分比。优点•操作简便：南京抗酸染色
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