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l. Nicotiana tabacum seed endophytic communities share a commoncore structure and genotype-specific signatures in diverging cultivars【J】.Computational and Structural Biotechnology Journal， 2020， 18。本发明属于核酸提取纯化技术领域，具体涉及一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法。 背景技术： 二氧化硅能在盐和特定pH值条件下可逆的结合DNA，这也是硅珠法、磁珠法、硅胶膜法提取DNA的理论基础；在高浓度离液盐和低pH值条件下，二氧化硅能通过氢键与DNA结合，而蛋白质、脂类、糖类等杂质因不能被结合从而被去除，去除离液盐、提高pH值之后，DNA与二氧化硅之间的相互作用力减弱，DNA从二氧化硅表面释放，从而获得纯化的DNA；闵行区FastDNA SPIN土壤试剂盒土壤DNA提取销售上海益启生物公司的土壤DNA提取附带使用说明书吗？
所述pH缓冲剂为Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠，所述pH缓冲剂的pH值为7.0-11，推荐的pH缓冲剂为Tris-HCl，推荐的pH缓冲剂的pH值为7.5-8.5； （b）结合液，其组成成分包括表面活性剂、离液盐、pH缓冲剂； 所述表面活性剂为：聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40中的一种或两种及以上的混合，所述表面活性剂的质量浓度为1-100g/L； 所述离液盐为异硫氰酸胍、盐酸胍、硫氰酸钾、高氯酸钠、碘化钾、碘化钠中的一种或两种及以上的混合，所述离液盐的浓度为3-5 mol/L； 所述pH缓冲剂为Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠，所述pH缓冲剂的pH值为4.5-7.0；
取100-200 mg土壤样品，加入样品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震荡混匀后，75℃加热裂解15分钟； b.最大转速离心5分钟，将上清液转移至新的样品管中，加入800 ul结合液，混匀； c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料，分离液体和硅基DNA吸附材料； d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料； e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA； 2）PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增，在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果： 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法，配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液，利用特殊成分的土壤裂解液，在加入结合液之前，样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合，离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液，上清液中加入结合液，混合后转入含有硅基DNA吸附材料中，分离液体和硅基DNA吸附材料，漂洗硅基DNA吸附材料，洗脱获得纯化DNA；全网优惠的土壤DNA提取在哪里购买？
PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒，10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板，扩增程序为，95℃，11分钟；94℃，20 秒，59℃，3分钟，30个循环；60℃，10分钟；4℃保存；电泳在ABI 3500XL仪器中进行；电泳上样体系为，1 μl PCR产物，9 μl甲酰胺，其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1）DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤，烘干，取100-200 mg土壤样品，加入样品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震荡混匀后，75℃加热裂解15分钟；最大转速离心5分钟，将上清液转移至新的样品管中，加入800 ul结合液，混匀；混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中，上海益启，采购土壤DNA提取的放心之选。金山区土壤基因组土壤DNA提取报价
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