[VIP第1年] 指数:3
相较于IHC染色是针对「蛋白质」抗原，化学染色法则是针对组织的化学及物理特性进行染色。????免疫组织化学染色(IHC)：针对要观察的蛋白质「抗原」，选择具专一性的「抗体」来进行标定。具有高度专一性的特点，但会受检体固定及保存品质极大的影响。????原位杂合试验(ISH)：使用核酸探针(probe)来标定组织中的特定核酸片段。相较于IHC用于分析蛋白质，ISH则是用以分析核酸在组织中的分布。在缺乏专一性抗体可以使用的情形下，ISH可藉由侦测相关核酸片段，达到直接或间接检测特定病原或蛋白质前趋物的作用。免疫组织化学染色用于标记特定蛋白质。南京镀银染色结果分析
对于荧光染色切片往往需要用到冰冻包埋及切片基本原理：•快速冷却：将新鲜的组织样本迅速冷却到低温（通常为-20°C至-30°C），使其变得坚硬。•切片：使用冷冻切片机将冷冻的组织切成薄片。由于组织没有经过固定的步骤，因此可以较好地保存细胞膜表面和细胞内的多种酶活性以及抗原免疫活性。优势：•快速：制作过程比石蜡切片更快捷，通常只需几分钟到几十分钟。•简便：不需要复杂的脱水、透明化和浸蜡步骤。•活性保留：能够较好地保存细胞内的酶活性和抗原免疫活性，适用于需要检测这些活性的研究。南京间苯二酚碱性品红染色甲苯胺蓝染色常用于检测肥大细胞颗粒。
选择合适的染色方法取决于实验的具体目的和需要检测的组织或细胞成分。以下是一些常见的实验目的及其相应的染色方法：1.观察组织结构和细胞形态：•H&E染色（苏木精-伊红染色）：适用于常规组织学和病理学检查，能够清晰区分细胞核和细胞质，显示组织结构和病变。2.检测结缔组织和纤维化：•Masson三色染色：用于区分肌肉、胶原纤维和细胞质，适合研究结缔组织和纤维化病变。3.检测糖原和多糖类物质：•PAS染色（过碘酸-Schiff反应）：用于检测糖原、***和其他多糖类物质，常用于诊断糖原贮积病和******。
病理染色切片过程中值得注意的是1％伊红水溶液是理想的胞浆染液。要选择好水溶性的伊红染料使胞质鲜艳一些，切片不但漂亮且利于观片。(9)切片染色后的脱水要充分，每道乙醇脱水的时间不要过短，尤其是三道无水乙醇更为如此。无水乙醇要勤更换。(10)切片经***一次无水乙醇后尽快地放人二甲苯中。在夏季室内湿度较大的环境中更是如此。如切片在湿度大的空气中停留时间过长就会在封片时产生雾气，而不能现片。其原因是无水乙醇吸收了空气中的水汽，在二甲苯中难以分离析出，当用中性树胶封片后，二甲苯挥发，而水汽留在胶中产生雾气。(11)封片所使盖玻片需大小合适、清洁。树胶用量视盖玻片大小而定，要求不发生溢胶或缺如。(12)不提倡切片经无水乙醇，然后干燥，直接用中性树胶封固。这样会产生人为的细小黑点，与细胞核相似。(13)封片要在通风厨中进行，防止二甲苯污染工作间，危害技师的身体。染色切片在教学中用于展示组织学特征。
3. 普鲁士蓝反应：•用蒸馏水清洗切片后，将其浸入含有亚铁**钾（K₄[Fe(CN)₆]）的溶液中，在室温下孵育一段时间（通常是10-20分钟），形成普鲁士蓝沉淀。4. 复染：•为了更好地观察组织结构，通常会进行复染，例如使用苏木精染色（Hematoxylin）。5. 脱水、透明和封片：•用乙醇梯度脱水，然后用二甲苯透明处理，***用中性树胶封片。6. 显微镜观察：•在显微镜下观察染色后的切片，蓝色沉淀表示铁的存在。优点•特异性高：鲁士蓝染色对铁离子具有高度特异性，能够准确地检测和定位铁沉积。•操作简便：染色步骤相对简单，不需要复杂的仪器设备。•结果直观：染色后的铁沉积呈现明显的蓝色，易于观察和分析。染色切片可以显示细胞增殖和凋亡。南京尼氏染色检测
病理学家通过染色切片分析组织变化。南京镀银染色结果分析
不同的染色方法可以达到不同的实验目的4.观察神经组织：•银染色：用于显示神经纤维和细胞外基质，适合神经组织的研究。5.检测特定蛋白质或抗原：•免疫组化染色：利用抗体与特定抗原结合，通过酶或荧光标记显示抗原位置，广泛应用于**研究和诊断。•免疫荧光染色：利用荧光标记的抗体与特定抗原结合，在荧光显微镜下观察，适用于研究细胞和组织中的特定蛋白质和分子。1.检测细胞增殖和凋亡：•Ki-67染色：用于检测细胞增殖。•TUNEL染色：用于检测细胞凋亡。1.研究血管生成：•CD31或VEGF染色：用于检测血管内皮细胞和血管生成相关蛋白。2.检测脂质和脂肪细胞：•油红O染色：用于检测脂质和脂肪细胞，常用于研究脂肪组织和代谢疾病。南京镀银染色结果分析
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