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问题 可能的原因 处理方法 印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。 印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。 采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。 印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形 采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。 印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。 否正确买组蛋白抗体哪家专业？崇明区H3抗体抗体报价
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。上海鉴定抗体抗体联系电话Sigma抗体上海授权代理商。
对于成功的ChIP实验，选择适当的ChIP抗体是**关键的步骤之一。即使是比较高质量的抗体，即在经典的Western blot验证中表现非常好的抗体，也不一定适合ChIP。比较好只考虑使用在ChIP实验中专门验证过的抗体。一般的， ChIP实验之后会用定量PCR（qPCR）来验证某一特定DNA序列是否与靶蛋白有关。研究人员可以采用这种经典方法评估目标蛋白与已知的靶基因之间的相互作用。 ChIP实验可以细分为以下几个主要步骤： 样品制备 蛋白与DNA交联 细胞裂解和染色质片段化 染色质免疫沉淀
在阴性对照（igG或mockIP）样品中本底较高 抗体过量导致抗体与非靶蛋白结合∶ 与珠子的非特异性结合∶ 染色质的不完金裂解∶ 试剂污染∶ "无DNA" PCR反应显示信号 DNA的较低回收率 ChIP抗体无效或较低亲和力： ChIP抗体不足： 起始样品不足： 细胞不完全溶解和无效裂解： 交联过度： 交联不足： 亲和力较低或珠子质量较差： PCR引物： 优化抗体的浓度。 加入-个残***步理，以除这些非特异性蛋白或添加珠子的阻断剂。 优化取解过程，以民得介于200-100bp长度的染色质。上海买Abcam抗体哪家靠谱？
这是为了避免或尽量减少冻融循环。抗体溶液不可反复冻融，因为这可以导致抗体。 聚集，从而引起活性丧失。因此，贮存溶液应在保存前先进行分装。未稀释抗体应在保存于-20℃之前分装，以尽量减少可使抗体变性的反复冻融循环。集中保存抗体可预防或尽量减少降解。可在抗体溶液中加入终浓度为50%的冷冻保护剂，如甘油，以预防冻融造成的损失。请勿将含甘油的抗体保存于-80℃。通常不对酶结合抗体进行冷冻，以免损失酶活性及其结合能力。上海买Merck抗体哪家靠谱？嘉定区Sigma抗体抗体订购
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