病理染色可用于研究疾病机制•病理过程:病理染色可以帮助研究人员了解疾病的发病机制和发展过程。例如,通过连续的切片染色,可以观察到疾病的进展和变化。•分子标记:免疫组化染色等特殊染色方法可以用于检测特定的蛋白质或其他生物分子,揭示其在疾病过程中的作用。4. 评估药物疗效和毒性•药物效果:在药物研发过程中,病理染色可以用来评估药物对组织的影响,包括药物的***效果和潜在的副作用。•毒性研究:通过染色,可以观察到药物引起的组织损伤或毒性反应,帮助确定药物的安全性。5. 比较研究•对照组与实验组:在动物实验中,通常会设置对照组和实验组。通过病理染色,可以比较不同组之间的组织结构和细胞状态,从而验证实验假设。•不同条件下的差异:可以比较不同实验条件(如不同剂量、不同时间点)下的组织变化,了解各种因素对组织的影响。CD34染色用于标记血管内皮细胞。南京阿里辛蓝-过碘酸雪夫染色检测
病理染色切片过程中值得注意的是1%伊红水溶液是理想的胞浆染液。要选择好水溶性的伊红染料使胞质鲜艳一些,切片不但漂亮且利于观片。(9)切片染色后的脱水要充分,每道乙醇脱水的时间不要过短,尤其是三道无水乙醇更为如此。无水乙醇要勤更换。(10)切片经***一次无水乙醇后尽快地放人二甲苯中。在夏季室内湿度较大的环境中更是如此。如切片在湿度大的空气中停留时间过长就会在封片时产生雾气,而不能现片。其原因是无水乙醇吸收了空气中的水汽,在二甲苯中难以分离析出,当用中性树胶封片后,二甲苯挥发,而水汽留在胶中产生雾气。(11)封片所使盖玻片需大小合适、清洁。树胶用量视盖玻片大小而定,要求不发生溢胶或缺如。(12)不提倡切片经无水乙醇,然后干燥,直接用中性树胶封固。这样会产生人为的细小黑点,与细胞核相似。(13)封片要在通风厨中进行,防止二甲苯污染工作间,危害技师的身体。南京TTC染色结果分析苏木精-伊红(H&E)染色是常用的组织学染色方法。
病理染色需要注意这些事项:(4)Harris苏木精染液配制的好坏直接影响切片染色质量。好的苏木精染液500ml正常染色能力为2500张左右。为保证染色质量应及时更换染液。(5)苏木精染液要经常过滤以保证染色清洁而不在切片上有染色渣的出现。(6)盐酸乙醇分化液配制参见本书第十二章。分化时间可根据分化液的新旧适当调整,新的分化液时间短些。分化的目的就是让该染上要清晰地染上,而不该着色的一定要分化掉。(7)氨水返蓝液浓度不可过高,返蓝时间不可过高,不要过长,否则会发生脱片现象。
常见染色方法有:苏木精-伊红染色(H&E染色)•用途:是**常用的组织学染色方法,适用于几乎所有类型的组织。•结果:细胞核被苏木精染成蓝色或紫色,细胞质被伊红染成粉红色。Masson三色染色•用途:用于显示胶原纤维、肌纤维和细胞核。•结果:胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色,细胞核呈蓝黑色。天狼星红染色•用途:用于显示胶原纤维,在偏振光下区分不同类型的胶原纤维。•结果:I型胶原纤维呈亮黄色或橙红色,III型胶原纤维呈绿色或黄色。PAS染色(过碘酸雪夫染色)•用途:用于检测糖原和其他多糖物质。•结果:糖原和其他多糖物质呈紫红色或粉红色。银染技术•用途:用于显示神经纤维、网状纤维等。•结果:神经纤维和网状纤维呈黑色或深棕色。免疫组化染色•用途:用于检测和定位特定的蛋白质或抗原。•结果:特定的蛋白质或抗原被标记并显现出特定的颜色。苏木精-伊红染色是很常用的染色方法。
•病理染色流程之组织脱水:样品经过固定后,将通过一系列的酒精梯度逐步脱水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蜡中。这一系列步骤旨在去除组织中的水分,使其变得坚硬并易于切片。•石蜡包埋区:脱水后的组织被包裹在石蜡中,形成一个坚硬的块状物,便于后续的切片操作。•切片制作区:使用石蜡切片机(如Leica HistoCore MULTICUT)将包埋好的组织切成薄片(通常为4-5微米厚),以便于进一步的染色和观察。
英瀚斯专业病理实验平台,从取材固定包埋脱水切片染色拍照分析,一站式完成。 Prussian蓝染色用于检测铁沉积。南京碱性磷酸酶染色结果分析
免疫组织化学染色用于标记特定蛋白质。南京阿里辛蓝-过碘酸雪夫染色检测
TTC染色的操作相对简单,不需要复杂的仪器设备。•直观性强:染色结果直观,易于观察和分析。•快速:染色过程较快,可以在短时间内完成。注意事项•温度控制:染色过程中需要严格控制温度,过高或过低的温度都会影响染色效果。•时间控制:孵育时间不宜过长,否则可能会导致非特异性染色。•固定处理:染色后应及时进行固定处理,以防止组织自溶。总结TTC染色是一种简单且有效的组织学染色方法,广泛应用于心肌梗死和脑卒中模型的研究中,能够直观地显示组织中的活性区域和缺血损伤区域,为疾病机制的研究和药物疗效的评估提供了重要手段。南京阿里辛蓝-过碘酸雪夫染色检测
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